谷胱甘肽测试方法
发布时间：
2021/09/15 00:00
谷胱甘肽(Glutathione，通称GSH)，又称为还原型谷胱甘肽，主要是由磷酸、半胱氨酸及甘氨酸融合成的，人体中的每一个体细胞几乎都有谷胱甘肽它的存在，也普遍存在动物与植物中(如燕麦粉、箩卜、小番茄、番茄、蛋白质食物等)及微生物菌种身体内。现阶段工业化生产的谷胱甘肽关键采用酶合成法纪取，其纯净度高，水溶好。谷胱甘肽属于一种活性肽，拥有极为重要的生理作用，其分子式里面含有一个疏基构造，因此具备降低胆固醇的生物活性，因此谷胱甘肽在护肤品、药业等行业中有着广泛运用。企业制造的98%的还原型谷胱甘肽归属于护肤品级，具有较好的水溶，便捷配置到各种护肤品中。
谷胱甘肽由来
谷胱甘肽的制备方法关键有四种：酶合成法、有机溶剂获取法、有机化学合成法及其发酵。企业选用酶合成法制取谷胱甘肽，所得到的商品纯净度高，对空气污染小，具有很好的性价比高。
酶合成法
以L-半胱氨酸、L-磷酸、甘氨酸为原料，加上生物里的谷胱甘肽合成酶，并添加少许ATP或ADP合成谷胱甘肽。
有机溶剂获取法
以燕麦粉和酵母为原料，再经过层析分离制得谷胱甘肽。
有机化学合成法
以半胱氨酸、磷酸、甘氨酸为原料合成谷胱甘肽。
发酵
以糖原为原料，运用身体内微生物的代谢把它转化成谷胱甘肽。
谷胱甘肽的检测方式许多，常见的方法有碘量法，(Ellman实验试剂)法，氟苯铁氰 化钠法，荧光法，四氧嘧啶法和液相色谱法(HPLC)。 以上方法都各有优势，检验谷胱甘肽含量时，能够按照计划选择合适，灵巧，精确的检测方式。
酶活性测定
原理：与谷胱甘肽的巯基反映形成黄色的5-硫-2-氟苯 苯甲醛，在412 nm波优点有一个比较大吸收峰，而在400 nm之上基本没有吸收峰，向带有谷胱甘肽的试品里加入少许，精确测量反映溶液在412 nm处吸光度，并依据吸光度得到谷胱甘肽含量。
具体步骤：
储存溶液的制取：将0.01 mol / L 融解在0.05 mol / L磷酸盐缓冲液(pH 7.0)是以产生储存溶液。
剖析溶液的制取：用0.5 mol / L，pH8.0 Tris-HCl缓存溶液稀释液贮备溶液100倍，制取剖析溶液，暗夜里储存，提前准备用以现阶段应用。
操作流程：取0.5 mL谷胱甘肽规范溶液或检测试品溶液(0.1〜3.0 mol / L)，把它添加1.5 mL含量为0.15 mol / L的NaOH溶液中，随后添加3%室内甲醛， 溶液为05mL，并在pH 8.0和25℃下反映2min，反映后，将0.5mL反映溶液加入到剖析溶液中，在25℃下反映5min，并且在412nm的光波长处精确测量吸光度，依据两者的吸光度，计算出差别并带入标曲以测算谷胱甘肽含量。
碘量分析
原理：运用谷胱甘肽的氧化性与碘酸钾反映，当谷胱甘肽完全反应时，碘酸钾会把碘酸钾空气氧化为碘，碘会让木薯淀粉显色剂变蓝，这也是滴定管的终点站。
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