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谷胱甘肽测试方法

发布时间:

2021/09/15 00:00

谷胱甘肽(Glutathione,通称GSH),又称为还原型谷胱甘肽,主要是由磷酸、半胱氨酸及甘氨酸融合成的,人体中的每一个体细胞几乎都有谷胱甘肽它的存在,也普遍存在动物与植物中(如燕麦粉、箩卜、小番茄、番茄、蛋白质食物等)及微生物菌种身体内。现阶段工业化生产的谷胱甘肽关键采用酶合成法纪取,其纯净度高,水溶好。谷胱甘肽属于一种活性肽,拥有极为重要的生理作用,其分子式里面含有一个疏基构造,因此具备降低胆固醇的生物活性,因此谷胱甘肽在护肤品、药业等行业中有着广泛运用。企业制造的98%的还原型谷胱甘肽归属于护肤品级,具有较好的水溶,便捷配置到各种护肤品中。

谷胱甘肽由来

谷胱甘肽的制备方法关键有四种:酶合成法、有机溶剂获取法、有机化学合成法及其发酵。企业选用酶合成法制取谷胱甘肽,所得到的商品纯净度高,对空气污染小,具有很好的性价比高。

酶合成法

以L-半胱氨酸、L-磷酸、甘氨酸为原料,加上生物里的谷胱甘肽合成酶,并添加少许ATP或ADP合成谷胱甘肽。

有机溶剂获取法

以燕麦粉和酵母为原料,再经过层析分离制得谷胱甘肽。

有机化学合成法

以半胱氨酸、磷酸、甘氨酸为原料合成谷胱甘肽。

发酵

以糖原为原料,运用身体内微生物的代谢把它转化成谷胱甘肽。

谷胱甘肽的检测方式许多,常见的方法有碘量法,(Ellman实验试剂)法,氟苯铁氰 化钠法,荧光法,四氧嘧啶法和液相色谱法(HPLC)。 以上方法都各有优势,检验谷胱甘肽含量时,能够按照计划选择合适,灵巧,精确的检测方式。

酶活性测定

原理:与谷胱甘肽的巯基反映形成黄色的5-硫-2-氟苯 苯甲醛,在412 nm波优点有一个比较大吸收峰,而在400 nm之上基本没有吸收峰,向带有谷胱甘肽的试品里加入少许,精确测量反映溶液在412 nm处吸光度,并依据吸光度得到谷胱甘肽含量。

具体步骤:

储存溶液的制取:将0.01 mol / L 融解在0.05 mol / L磷酸盐缓冲液(pH 7.0)是以产生储存溶液。

剖析溶液的制取:用0.5 mol / L,pH8.0 Tris-HCl缓存溶液稀释液贮备溶液100倍,制取剖析溶液,暗夜里储存,提前准备用以现阶段应用。

操作流程:取0.5 mL谷胱甘肽规范溶液或检测试品溶液(0.1〜3.0 mol / L),把它添加1.5 mL含量为0.15 mol / L的NaOH溶液中,随后添加3%室内甲醛, 溶液为05mL,并在pH 8.0和25℃下反映2min,反映后,将0.5mL反映溶液加入到剖析溶液中,在25℃下反映5min,并且在412nm的光波长处精确测量吸光度,依据两者的吸光度,计算出差别并带入标曲以测算谷胱甘肽含量。

碘量分析

原理:运用谷胱甘肽的氧化性与碘酸钾反映,当谷胱甘肽完全反应时,碘酸钾会把碘酸钾空气氧化为碘,碘会让木薯淀粉显色剂变蓝,这也是滴定管的终点站。

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